cube-biotech他的親和力樹脂和磁珠說明書
更新時間:2022-09-27 點擊次數:1294
cube-biotech他的親和力樹脂和磁珠說明書
多組氨酸標簽/Poly-His-標簽是應用廣泛的蛋白質親和標簽。由于其只有六個氨基酸的小尺寸,它很少干擾蛋白質的功能。此外,它在天然和變性條件下的低免疫原性和多功能性突出了這種蛋白質標簽。His-tag 的基本純化原理是金屬離子與組氨酸咪唑環之間的相互作用。
His-tag 純化樹脂和磁珠:
選擇正確類型的 His-tag 純化樹脂或磁珠基于三個因素:
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配體:這是金屬離子在螯合劑復合物中偶聯的分子(見圖 1)。
Cube Biotech 提供三種不同的配體。
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NTA:次氮基三乙酸是常用的配體。它與鎳的螯合劑絡合物如圖 1 所示。
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IDA:亞氨基二乙酸是第二常用的一種。單擊此處了解IDA 和 NTA 之間的區別。
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INDIGO:這種配體是在 Cube Biotech 開發的。它的優點之一是大大提高了 DTT 和 EDTA 耐受性。單擊此處了解有關 INDIGO的更多信息。
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偶聯的金屬離子:取決于與配體偶聯的金屬離子,His 標簽純化的親和力和特異性會發生變化。經驗法則:蛋白質產量越高,純化的特異性越低。圖 2 給出了用于 His-tag 純化的常用金屬離子的親和力/特異性比率的一個概覽。
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珠子的大小:使用的珠子直徑越大,FPLC 純化的流速越高。然而,具有較慢的流速通常會增加蛋白質產量。我們提供 30 µm、40 µm、100 µm 和 XL 尺寸(~400 µm)的珠子直徑。可根據要求提供更多尺寸。參見圖 3 以供參考。
His-tag 親和樹脂和 MagBeads 的詳細信息:
圖 1:由 NTA 和鎳2+組成的螯合劑復合物的示意圖。該鎳離子與添加到蛋白質中的 His 標簽的兩個咪唑環結合。
圖 2:His 標簽蛋白純化中常用的金屬離子概述。銅的親和力高,而特異性低。鈷標志著光譜的另一端。鎳是常用的金屬離子,在親和力和特異性之間具有良好的平衡。
產品信息“PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose”
| 類型: | 瓊脂糖 |
| 珠子大小: | 100 µm(瓊脂糖) |
| 親和力: | 他的標簽 |
| 目的: | 蛋白質純化 |
| 配體: | 靛青 |
| 耦合離子: | Ni2+ |
PureCube 100 INDIGO-Ni 瓊脂糖樹脂是 Cube Biotech 為高質量的 His-tag 蛋白質純化而開發的產品。其目的是創造一種瓊脂糖樹脂,能夠承受高濃度的螯合劑,如 EDTA 和 DTT,這些螯合劑在哺乳動物細胞培養緩沖液中很常見。得到的 INDIGO 配體具有 20 mM 的 DTT 和 EDTA 公差。這遠遠優于其他競爭樹脂。INDIGO-Ni 也可用作磁珠或預裝在墨盒/柱中。