immuquest IQ213說明書

Anti-hnRNP K antibody [3C2] - ChIP Grade

抗hnRNP K抗體[3C2] - ChIP級(jí)

目錄號(hào)：IQ213

£226.00

目標(biāo)抗原

hnRNP K. 

主要說明

小鼠抗hnRNP K [3C2] - ChIP等級(jí)

目錄編號(hào)

IQ213

數(shù)量

0.1毫升

濃度

1mg / ml的

克隆

3C2

主辦

老鼠 

同型

IgG2b的

免疫原

全長天然蛋白質(zhì)（純化的）（人類）

骨髓瘤/融合伴侶

SP2 / 0

物種反應(yīng)性

鼠標(biāo)，大鼠，倉鼠，牛，人類，非洲爪蟾

純化

蛋白質(zhì)A.

格式

純化的抗體（來自上清液）含有PBS 0.1％;Sodium azide

應(yīng)用

WB，IP，ELISA，ICC / IF，流式細(xì)胞儀，ChIP /芯片，IHC（大鼠）

稀釋液

宜抗體稀釋應(yīng)通過滴定確定，但作為指導(dǎo)嘗試;

WB：1/1000。檢測到約65 kDa的條帶（預(yù)測分子量：51 kDa）

流式細(xì)胞：使用1μg106個(gè)細(xì)胞

ChIP /芯片：以分析依賴稀釋度使用。PubMed：20673990

參考

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聚（C）結(jié)合異構(gòu)核核糖核蛋白復(fù)合物K蛋白的表征和一級(jí)結(jié)構(gòu)。Matunis M（Cell.Biol，1992年1月）  PMID：1729596

數(shù)據(jù)庫鏈接

Entrez Gene：528135牛

Entrez Gene：3190 Human

Entrez基因：15387鼠標(biāo)

Entrez基因：117282大鼠

Omim：600712人類

SwissProt：Q3T0D0牛

SwissProt：P61978人類

SwissProt：P61979鼠標(biāo)

SwissProt：P61980大鼠

Unigene：522257人類

Unigene：142872鼠標(biāo)

Unigene：11854鼠

研究領(lǐng)域

染色質(zhì); RNA結(jié)合;

也稱為

CSBP抗體; dC拉伸結(jié)合蛋白抗體; FLJ41122抗體;異種核核糖核蛋白K抗體; hnRNP K抗體; HNRNPK抗體; HNRPK抗體; HNRPK_HUMAN抗體;轉(zhuǎn)化上調(diào)核抗體;轉(zhuǎn)化上調(diào)核蛋白抗體;轉(zhuǎn)化上調(diào)核蛋白抗體;轉(zhuǎn)化上調(diào)的核蛋白抗體; TUNP抗體

本產(chǎn)品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。

異質(zhì)核RNA（hnRNA）的微粒復(fù)合物是高M(jìn)r的RNA分子的異質(zhì)混合物，其在蛋白質(zhì)合成過程中在細(xì)胞核中發(fā)生，具有細(xì)胞特異性和異質(zhì)性的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組分可能在加工過程中起作用。 hnRNA對(duì)mRNA的影響

免疫熒光方案 - 甲醛固定

   1.從Tcunit收集細(xì)胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.在室溫下在軌道振蕩器上將細(xì)胞在預(yù)熱（37℃）對(duì)甲醛中孵育12分鐘。
   4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5％Triton X-100中孵育5分鐘。
   5.準(zhǔn)備封閉試劑，這也是抗體稀釋劑。
   6.在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞2次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
   7.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   8.準(zhǔn)備一抗（50μl/蓋玻片）和濕潤染色室。
   9.在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞2次并短暫風(fēng)干。
  10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時(shí)。在此期間準(zhǔn)備二抗。
  11.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次（每個(gè)燒杯更換5個(gè)燒杯/ 5個(gè)計(jì)數(shù)）
  12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時(shí)。
  13.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次。
  14.登上達(dá)皮。

溶液（染色當(dāng)天新鮮制備）。

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
    *固定液：3.5％對(duì)甲醛。

1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應(yīng)為7.4。完成體積，d.H20至25ml，加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。


免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定

   1.從TCunit收集細(xì)胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.用冷甲醇：丙酮1：1在冰上固定細(xì)胞10分鐘。
   4.制備阻斷試劑，這也是抗體的稀釋劑。
   5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞3次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
   6.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   7.準(zhǔn)備一抗（50？l /蓋玻片）和濕染色室。
   8.在室溫下用1x PBS洗滌細(xì)胞2次并風(fēng)干約7分鐘。
   9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時(shí)，在染色室中避光。在此期間準(zhǔn)備二抗。
  10.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次（每個(gè)燒杯更換5次燒杯/ 5次計(jì)數(shù)）
  11。在室溫下，在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時(shí)。
  12.用1x PBS洗滌細(xì)胞5次。
  13.登上達(dá)皮。

溶液（染色當(dāng)天新鮮制備）

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
    *固定液：甲醇：丙酮1：1冰冷。



Western Blotting Protocol

   1.將凝膠轉(zhuǎn)移到PDVF或硝酸纖維素膜上
   2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時(shí)
   3.在洗滌緩沖液中沖洗
   4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時(shí)
   5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
   6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時(shí)
   7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
   8.檢測（例如ECL，Amersham根據(jù)制造商的說明）

洗滌緩沖液
PBS + 0.1％Tween 20 

阻斷緩沖液
洗滌緩沖液+ 5％奶粉

所用抗體的濃度取決于每種抗體，抗原的量和所用的檢測方法。通常，稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內(nèi)，但通常必須憑經(jīng)驗(yàn)確定。

研究領(lǐng)域
染色質(zhì)RNA結(jié)合
研究
表征聚（C）結(jié)合異質(zhì)核核糖核蛋白復(fù)合物K蛋白的基本結(jié)構(gòu) - Matunis M通過p21 mRNA轉(zhuǎn)錄調(diào)控參與Hu和異質(zhì)核核糖核蛋白K在神經(jīng)元分化中的作用 - Masato Yano等